浅议桂枝四逆散抗疲劳作用的实验

　　
　　浅议桂枝四逆散抗疲劳作用的实验
　　【摘要】目的:观察桂枝四逆散对小鼠耐缺氧能力和对小鼠抗疲劳实验作用的影响。方法:将实验动物分为大、小2个剂量组进行灌胃给药,对照组给予等体积生理盐水,14d后进行多项指标检测。结果:桂枝四逆散可提高小鼠抗缺氧、游泳、转棒的能力,延长小鼠的存活时间,并具有明显的抗疲劳作用。结论:桂枝四逆散对增加心肌供血及耐缺氧抗疲劳有确切作用,值得临床研究应用。
　　【关键词】桂枝四逆散;抗缺氧;疲劳;小鼠
　　桂枝四逆散具有疏肝行气,调和阴阳的功能,临床上用于改善亚健康状态所致的疲劳症状。经426例亚健康状态人群服用,有显着的抗疲劳作用。该动物实验观察旨在进一步验证并探讨中药复方的药效及其机理,为临床提供更加确切用药依据。
　　1材料与方法
　　1.1材料
　　1.1.1动物及分组
　　Wistar小鼠,147只,体重(20±2)g,雌雄兼用,由山东医学科学研究院实验动物中心提供。随机分为3组,每组49只,即正常对照组、中药大剂量组、中药小剂量组。
　　1.1.2药物
　　桂枝四逆散方药组成:柴胡、枳实、桂枝、白芍、甘草、大枣、生姜。由山东中医药大学中鲁医院制剂室提供100%水煎剂(每mL含原生药1g),4℃冰箱保存备用。
　　1.2实验方法
　　1.2.1给药方法
　　中药大剂量组灌胃10g·kg-1·d-1,中(本文转载自 www.yzbxz.com 一枝笔写作网)药小剂量组灌胃5g·kg-1·d-1,日1次。正常对照组给等体积生理盐水。连续14d,15d晚开始禁食不禁水,16d收集标本备用。
　　1.4.2观察项目及检测方法。
　　1.4.2.1小鼠血清LDH活性检测小鼠尾静脉采血,用2,4-二硝基苯肼比色法测定各鼠血清LDH活性。
　　1.4.2.2小鼠运动后血乳酸值的检测让小鼠在(28±2)℃水中游泳30min。泳前安静时及泳后20min、50min,各鼠分别采尾血一次。用乙醛-对羟基联苯法测定血乳酸含量。

　　1.4.2.3小鼠肝糖原和肌糖原含量的测定将小鼠断头处死,立即取肝脏和后肢肌肉,用三氯醋酸沉淀蛋白,用蒽酮比色法测定糖原含量。
　　1.4.2.4小鼠血色素的测定小鼠眼眶取血,血红蛋白含量采用比色法测定。
　　1.4.2.5小鼠的耐缺氧能力实验把小鼠分别置于经容量标定的300mL广口瓶中,瓶内置20g钠石灰以吸收CO2和水分,瓶盖涂以凡士林密封,记录小鼠的死亡时间,即存活时间。
　　1.4.2.6小鼠游泳实验在小鼠尾部加10%体重的负荷,放置于水温(26±1)℃,水深15cm的游泳缸内,观察小鼠的游泳时间,以小鼠沉到水底6s内不再游出水面为准。
　　1.4.2.7小鼠转棒实验把小鼠放置于电动转棒上(转速为2档,20r/min)以1min内不落下为准。
　　1.5统计学处理
　　全部数据均以均数±标准差表示,组间比较采用t检验。
　　2结果
　　2.1小鼠血清LDH活性检测
　　见表1。
　　中药大小剂量组均能显着提高小鼠LDH活力,且中药大剂量组明显优于小剂量组。
　　2.2小鼠运动后血乳酸值的影响
　　见表2。
　　正常对照组及中药组在运动前及运动后20min的血乳酸值在组间比较无显着差异(P>0.05),而在运动后50min,中药组的血乳酸值比对照组显着降低,表明中药能降低小鼠运动后血乳酸水平,且中药大剂量组优于小剂量组。
　　2.3小鼠肝糖原和肌糖原含量的测定
　　见表3。
　　结果表明,中药组的肝糖原和肌糖原比对照组明显增加,但中药大小剂量组之间无显着差异。
　　2.4小鼠血色素的测定
　　见表4。
　　中药组比正常对照组有升高血色素的作用,但无显着性差异,P>0.05。
　　2.5小鼠的耐缺氧能力实验
　　见表5。
　　中药组较之正常对照组可明显提高小鼠耐缺氧,延长存活时间,效果显着,中药大剂量组优于中药小剂量组。

　　2.6小鼠游泳实验
　　见表6。
　　中药组可显着延长小鼠负重游泳持续时间,有明显的抗疲劳作用。中药大剂量组优于中药小剂量组。
　　2.7小鼠转棒实验
　　见表7。
　　中药组可显着延长小鼠转棒时间,有明显的抗疲劳作用。中药大剂量组优于中药小剂量组。
　　3讨论
　　本实验结果显示,中药复方桂枝四逆散煎剂能增强小鼠血清LDH活性,降低小鼠运动后血乳酸值水平,增加小鼠肝糖原和肌糖原含量,提高小鼠血色素含量,延长小鼠耐缺氧存活时间和小鼠游泳转棒存活时间。机体运动后,体内堆积过多乳酸是引起运动性疲劳的一个重要原因,而血乳酸的降低与消除有赖于LDH的参与。通过提高LDH活力以降低血乳酸水平是提高机体抗疲劳能力的途径之一。本实验结果表明,桂枝四逆散水煎剂能明显地增强LDH活力,有效地降低运动后血乳酸水平。另外,糖原贮备的提高有利于机体耐力速度的提高,并减少蛋白质和含氮化合物的分解代谢,降低血清尿素氮的形成。实验结果表明,桂枝四逆散能有效地提高小鼠肝糖原和肌糖原的贮备能力,增强机体对运动负荷的适应能力。机体在缺氧状态下存活时间反映其心肌耗氧量和心肌耐缺氧能力,心肌耐缺氧能力与机体应激能力和储备能力密切相关,随着年龄的增长,心肌耐缺氧能力降低,桂枝四逆散水煎剂能延长小鼠耐缺氧存活时间,提高(本文转载自 www.yzbxz.com 一枝笔写作网)小鼠耐缺氧能力,保护缺氧状态下心肌和大脑,提高小鼠机体抗应激能力。

　　桂枝四逆散由桂枝汤与四逆散合方组成。桂枝汤是“仲景群方之冠”,有滋阴和阳,调和营卫之功。四逆散是调和肝脾的代表方剂,具有疏肝解郁,调气机,和肝脾的功效。方中桂枝有扩张脑血管和冠状动脉的作用;能使心肌耗氧量降低,提高心肌工作效率;此外柴胡,枳实有抗缺氧作用。芍药可增加冠脉流量,降低心肌耗氧量,对心肌缺氧有保护作用[1];甘草,大枣在《神农本草经》属中品,有“益精、轻身”之用。综上所述,桂枝四逆散水煎剂对增加心肌供血及耐缺氧抗疲劳均具有确切的作用,且相互配伍协同,效果更佳。该煎剂具有一定的抗耐缺氧能力和抗疲劳作用,其作用机理有待进一步探讨。
　　【参考文献】
　　〔1〕曲京峰.中药学〔M〕.济南:山东大学出版社,1996.32
　　

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