实验分析心理因素对哮喘发病的影响及其作用机理(2)

　　*P<0.05,**P<0.01,vsnormalcontrolgroup;△△P<0.01,vsallergyinducedasthmamodelgroup;▲▲P<0.01,vsallergyandstressinducedasthmamodelgroup;□□P<0.01,vsLFRtreatedgroup;■P<0.05,■■P<0.01,vsdexamethasonetreatedgroup
　　2.2疏肝理肺方对应激条件下哮喘大鼠海马GRmRNA和下丘脑CRH阳性神经元的影响应激组与正常组比较，海马GRmRNA表达明显减少（P<0.01），下丘脑CRH阳性神经元的数目明显增加（P<0.01）；哮喘应激组与哮喘组比较，海马GRmRNA表达明显减少（P<0.01），下丘脑CRH阳性神经元的数目明显增加（P<0.01）；疏肝理肺组与理肺组比较，海马GRmRNA表达明显增加（P<0.01），下丘脑CRH阳性神经元的数目明显减少（P<0.01）。见表2。
　　2.3疏肝理肺方对应激条件下哮喘大鼠海马形态的影响光镜下观察结果：正常组大鼠海马锥体细胞排列规则，细胞核圆而大，核仁清晰；哮喘组大鼠海马锥体细胞排列较规则，CA3区可见暗神经元；应激组和哮喘应激组大鼠海马锥体细胞排列不规则，在CA3区可见大量的锥体细胞核固缩；地塞米松组和理肺组大鼠海马锥体细胞异常改变与哮喘应激组基本相近；疏肝理肺组大鼠海马锥体细胞排列比较规则，在CA3区核固缩神经元明显减少。
　　常规透射电镜下观察结果：正常组大鼠海马锥体细胞核形态规则，核膜光滑，核异染色质分布均匀，线粒体丰富，嵴排列规则；哮喘组大鼠海马锥体细胞核形态规则，但胞浆疏松，部分线粒体出现空泡，嵴排列紊乱；应激组和哮喘应激组大鼠海马锥体细胞核形态不规则，核异染色质明显增多，聚集成块，胞浆疏松，多数线粒体扩张、出现空泡、嵴排列紊乱；地塞米松组大鼠海马锥体细胞形态不规则，细胞器变性；理肺组大鼠海马锥体细胞胞浆疏松，多数线粒体扩张、出现空泡；疏肝理肺组大鼠海马锥体细胞核形态较规则，核膜光滑，核异染色质分布较均匀，胞浆疏松，线粒体丰富但致密。
　　2.4疏肝理肺方对应激条件下哮喘大鼠血浆IL4和IFNγ的影响应激组与正常组比较，血浆IL4水平明显升高（P<0.01），IFNγ水平明显降低（P<0.01）；哮喘应激组与哮喘组比较，血浆IL4水平明显升高（P<0.01），IFNγ水平明显降低（P<0.01）；疏肝理肺组与理肺组比较，血浆IL4水平无明显降低，IFNγ水平明显升高（P<0.05）。见表3。

　　表2各组大鼠海马GRmRNA和下丘脑CRH阳性神经元比较（略）
　　Tab2ComparisonofexpressionofGRmRNAinhippocampusandnumberofCRHpositiveneuronsinparaventricularnucleusofhypothalamusindifferentgroups
　　**P<0.01,vsnormalcontrolgroup;△△P<0.01,vsallergyinducedasthma
　　表3各组大鼠血浆IL4和IFNγ浓度比较（略）
　　Tab3ComparisonofplasmaIL4andIFNγindifferentgroups
　　**P<0.01,vsnormalcontrolgroup;△△P<0.01,vsallergyinducedasthmamodelgroup;▲P<0.01,▲▲P<0.01,vsallergyandstressinducedasthmamodelgroup;□P<0.05,vsLFRtreatedgroup;■P<0.05,vsdexamethasonetreatedgroup
　　2.5疏肝理肺方对应激条件下哮喘大鼠肺组织形态的影响正常组大鼠支气管及肺泡结构正常；应激组大鼠支气管周围及肺泡壁有少量炎细胞浸润；哮喘组和哮喘应激组大鼠支气管周围及肺泡壁有大量炎细胞浸润，支气管管腔狭窄，上皮细胞脱落，腔内有分泌物；地塞米松组大鼠支气管周围及肺泡壁亦有较多炎性细胞浸润；理肺组和疏肝理肺组大鼠支气管周围及肺泡壁炎细胞浸润明显减轻。
　　3讨论
　　应激是指机体受到各种应激原刺激时出现的以下丘脑垂体肾上腺皮质（hypothalamopituitaryadrenal,HPA）轴过度激活为主的一系列神经内分泌反应。适度的应激刺激对人体的健康和功能活动起着促进作用，使机体能够适应内外环境的变化；但长期持续的HPA轴功能亢进，可导致机体对各种感染性因素处于易感状态，造成免疫功能的障碍。应激时，HPA轴激活，下丘脑室旁核（paraventricularnucleus,PVN）的小www.51lunwen.com细胞神经元分泌CRH，CRH刺激垂体前叶释放促肾上腺皮质激素（adrenocorticotropichormone,ACTH），ACTH刺激肾上腺皮质合成和分泌糖皮质激素。本研究结果表明：在应激条件下，哮喘大鼠血浆皮质酮水平明显升高，说明束缚应激刺激可导致应激条件下哮喘大鼠HPA轴功能亢进，使血浆皮质酮水平升高。疏肝理肺组大鼠血浆皮质酮水平与哮喘应激模型组比较明显降低，但理肺组大鼠血浆皮质酮水平与哮喘应激组比较无统计学差异，说明疏肝理肺方可通过抑制应激条件下HPA轴的兴奋性，降低血浆皮质酮水平。
　　海马不仅是HPA轴的高位调节中枢，而且是应激损伤的敏感区，刺激海马可抑制应激诱导的皮质酮分泌，这种作用是由GR所介导的［1］。海马是GR含量最多的大脑区域，在应激引起内源性糖皮质激素升高的过程中起着复杂的调节作用［2］。有报道指出：慢性社会应激或束缚应激能不同程度地下调海马CA3区GRmRNA的表达，抗抑郁药治疗后可明显增加海马GRmRNA和盐皮质激素受体mRNA的表达，并能阻止应激诱导的CA3区GRmRNA的表达下调［3］。本研究结果表明：在应激条件下，哮喘大鼠海马CA3区GRmRNA的表达明显减少；疏肝理肺组大鼠海马CA3区GRmRNA的表达与哮喘应激组比较明显升高，而理肺组大鼠海马CA3区GRmRNA表达与哮喘应激组比较无明显差异，说明疏肝理肺方可通过调节应激反应，降低血浆皮质酮水平，升高海马CA3区GRmRNA的表达，从而对应激条件下哮喘大鼠HPA轴功能紊乱起到了一定的调节作用。
　　支气管哮喘属于中医“哮证”、“喘证”范畴。《素问?脏气法时论》云：“肺病者，咳喘逆气、肩背痛、汗出……”表明本病病位在肺。朱丹溪认为：“哮主乎痰。”《症因脉治?哮病》云：“哮病之因，痰饮留伏，结成窠臼，潜伏于内，饮食之伤或外有时令之风寒束肌表，则哮喘之症作矣。”清代李中梓云：“因内有壅塞之气，外有非时之感，膈有胶固之痰，三者相合，闭拒气道，搏击有声，发为哮喘。”《诸病源候论》云：“呷嗽者……痰气相击，随嗽动息……”由此可见，痰饮是哮喘发病的关键因素。古代医家早已认识到痰与七情的关系。《证治汇补》云：“惊恐忧思，痰乃生焉。”肝气郁滞，失于疏泄，横克脾土，脾失健运而痰浊内生；肝郁化火，炼液成痰，此皆因郁而生痰。郁痰贮于肺脏，壅阻肺气，不得宣降，而发咳、喘、哮证。代写毕业论文说明情志失调可导致痰饮内生，从而诱发哮喘。《金匮要略?痰饮咳嗽病》提出“病痰饮者，当以温药和之”。疏肝理肺方由小青龙汤和四逆散组成。小青龙汤中麻黄、桂枝发汗解表，以解“外有非时之感”；干姜、细辛、半夏温肺化饮，以除“膈中胶固之痰”，兼助麻黄、桂枝解表，同时可顺“内有壅塞之气”；五味子敛气、芍药养血、甘草益气和中，三药互配可制诸药之辛燥，以防太过。八味相配，使风寒解、水饮去、肺气复舒、宣降有权。四逆散方是调理气机的基本方之一，方中炙甘草甘温益气以健脾，柴胡透邪、疏肝解郁，枳实下气破结，芍药益阴养血柔肝。枳实、柴胡相配，一升一降，增强疏肝理气之功；柴胡、芍药相配，一散一敛，疏肝理脾而不伤阴；芍药、炙甘草酸甘化阴，柔肝缓急。四药互配，使邪去郁解、气血调畅。近代药理学研究表明：四逆散方中柴胡的活性成分柴胡皂苷有抑制中枢神经兴奋和抗炎的作用；白芍总苷可对抗应激后升高的血浆促肾上腺皮质激素，同时能促进脾淋巴细胞增殖，增强免疫功能；枳实可疏肝理气，还可抑制炎性细胞释放组胺［4］。枳实的有效成分挥发油对中枢神经系统亦有抑制作用［5］。有报道认为：肝郁多表现出神经内分泌免疫系统功能的改变，如肝郁证患者去甲肾上腺素、5羟色胺和多巴胺等中枢神经递质，肾上腺皮质功能以及免疫系统多项指标均发生变化［6］，说明中医肝的功能与现代医学的神经内分泌免疫网络密切相关［7］。肝在心理应激的调节中起决定性的作用，调肝具有调整神经内分泌免疫功能失调的作用［8］。(责任编辑：一枝笔写作事务所)